生物技术与组织培养
范睿 凌鹏 顾文亮 李付鹏 郝朝运 闫林 黄丽芳 邬华松
2013, 34(4): 636-640.
全长cDNA文库构建是改良胡椒性状的分子机理研究基础,有助于重要相关基因的克隆、功能分析、调控及其利用。以性状优良并具代表性的海南蒟(Piper hainanense)为试材,采用优化的In-Fusion SMARTerTM Directional cDNA Library Construction Kit技术,构建叶片材料的全长cDNA文库。结果表明:文库的滴度为2.0×106 cfu/mL,文库容量为1.3×106 cfu。从文库中随机挑取20个克隆进行质粒DNA提取、PCR及酶切鉴定,结果显示:插入片段大小为1.0~2.0 kb,重组率为100%,表明该文库质量较高,可满足后续研究需要。