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中国橄榄研究40年

  • 赖瑞联 ,
  • 陈瑾 ,
  • 韦晓霞 ,
  • 吴如健 , *
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  • 福建省农业科学院果树研究所,福建福州 350013
* 吴如健,E-mail:

赖瑞联(1990—),男,博士研究生,研究实习员,研究方向:果树生物技术与遗传资源。

收稿日期: 2020-07-08

  要求修回日期: 2020-08-14

  网络出版日期: 2020-11-26

基金资助

农业农村部物种品种资源保护(热带作物)项目(151821301354052701)

福建省自然科学基金项目(2019J01110)

福建省属公益类科研院所基本科研专项(2018R1013-3)

版权

版权所有,未经授权,不得转载、摘编本刊文章,不得使用本刊的版式设计。

Research of Chinese Olive in the Past 40 Years

  • LAI Ruilian ,
  • CHEN Jin ,
  • WEI Xiaoxia ,
  • WU Rujian , *
Expand
  • Fruit Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou, Fujian 350013, China
* WU Rujian,E-mail:

Received date: 2020-07-08

  Request revised date: 2020-08-14

  Online published: 2020-11-26

Copyright

Copyright reserved © 2020.

摘要

橄榄是我国热带亚热带特色果树,栽培历史悠久。40年来,我国橄榄研究取得长足进步,在一些领域获得重大突破,有力地支撑了橄榄产业的发展。本文全面梳理40年来我国橄榄研究发展历程及取得的主要成绩,总结橄榄种质资源、栽培技术、果实品质、保鲜加工、药理活性和生物技术等方面取得的重要进展。针对我国橄榄产业存在的问题及发展趋势,建议加强橄榄应用基础研究及产业关键性技术研发,推动橄榄产业转型升级与绿色发展。

本文引用格式

赖瑞联 , 陈瑾 , 韦晓霞 , 吴如健 . 中国橄榄研究40年[J]. 热带作物学报, 2020 , 41(10) : 2045 -2054 . DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.10.011

Abstract

Chinese olive is a typical fruit tree with a long history of cultivation in tropical and subtropical areas of China. In the past 40 years, scientific research of Chinese olive has made significant breakthroughs in several fields, which is conducive to supporting the development of the industry. In this paper, the development and achievement of scientific research of Chinese olive in the past 40 years were reviewed, and the important progress in germplasm resources, cultivation technology, fruit quality, preservation, processing, pharmacological activity and biotechnology were summarized. According to the existing problem and development trend of Chinese olive industry, it is important to strengthen the basic-application research and key technology innovation in the future, to promote the transformation, upgrading and development of industry of Chinese olive.

橄榄(Canarium Linn.)是热带亚热带地区特色经济作物,依据植物形态学,橄榄属于核果类,但传统上仍然将橄榄归为热带及亚热带果树类。橄榄主要分布在我国福建、广东、四川、广西、重庆和浙江等南部省份和地区,在越南中北部、马来半岛和日本南部也有少量分布。橄榄是我国卫生健康委员会发布的药食同源食品,其果实富含多酚、类黄酮、膳食纤维、矿质元素和有机酸等营养成分,在抗氧化、抗病毒、保护肝脏、提高免疫和调节血脂血糖等方面具有很好的药用价值。值得注意的是,橄榄与油橄榄、锡兰橄榄、滇橄榄果形相似,但并非同一物种。油橄榄(Olea europaea)属于木犀科齐墩果属,主要分布在地中海沿岸地区,20世纪开始引入中国栽培[1];锡兰橄榄(Elaeocarpus serratus)属于杜英科杜英属,原产于印度、斯里兰卡等,也是20世纪开始在中国引种种植[2];滇橄榄(Phyllanthus emblica)属于大戟科叶下珠属,又名余甘子,在我国主要分布于云南、福建等南部地区[3];而橄榄属于橄榄科,原产于中国,故英文名称通常翻译为Chinese olive[4]。自20世纪80年代起,橄榄的相关研究工作逐步得到重视,在种质资源[4]、栽培技术[5]、果实品质[6]、保鲜加工[7,8]和药理活性[9]等方面都取得了长足进展。橄榄生物技术研究虽然起步较晚,但也取得了一定的成效。本文系统总结了近40年来中国橄榄研究的发展历程、取得的主要成绩以及主要进展,并提出了中国橄榄研究未来的发展趋势以及重点研究领域。

1 发展历程与概况

1.1 发展历程

橄榄的科学研究开始于20世纪80年代,主要研究内容包括橄榄分类、栽培和种质资源等。90年代开始,橄榄的研究工作逐渐丰富,涉及栽培、加工、贮藏和药理活性等各个领域[10]。这一时期,邱武凌等[11]和彭成绩等[12]分别对福建和广东的橄榄品种资源和栽培分布展开了调查。在栽培技术方面,主要涉及耐寒性评价、病虫害防治、育苗移栽、扦插嫁接和控梢修剪等。此外,橄榄贮藏保鲜技术改良及其对果品质量的影响、橄榄简易加工技术、橄榄营养成分与药用价值等方面也有零星报道。总体来讲,受当时条件限制,这些相关研究有限且深度较浅,这段时间基本上处于橄榄研究的起步阶段。
进入21世纪后,橄榄研究工作得到进一步加强。橄榄果实品质与营养成分研究不断深入,包括橄榄果实重要化学成分的分布规律研究、提取工艺优化、化学结构鉴定、药理活性验证等。橄榄栽培学相关研究也更加系统,主要研究涉及橄榄病虫害发生规律与防治、生物学特性和高效栽培关键技术等。此外,橄榄新品种选育、种质资源鉴定评价和生物技术探索等也开始见诸报道。橄榄的研究工作进入稳步发展阶段。
2010年以后,随着现代生物学和生物技术的不断发展,采用分子生物学手段揭示橄榄相关机制的研究报道越来越多。同时,鲜食橄榄推广、药理活性挖掘和高附加值产品加工成为产业发展的主要方向。为满足产业发展需求,橄榄果实鲜食品质与药用价值评价、药理成分挖掘与鉴定、采后贮藏保鲜、加工工艺优化、抗寒性鉴定与机理解析等成为这一阶段研究的热点。同时,橄榄种质资源性状评价、分子标记鉴定、栽培技术创新和优新品种选育也是这一时期橄榄研究的重要内容。这阶段橄榄研究工作针对性强、覆盖面广、研究深度深,进入快速发展时期。

1.2 概况

橄榄研究40年来,在种质资源、栽培技术、果实品质、保鲜加工、药理活性和生物技术等领域都取得了一定进展,有力支撑了我国橄榄产业的稳步发展。在基础研究方面,我国是目前世界上开展橄榄基础研究最多的国家,其中公开发表的大部分橄榄相关的SCI收录论文集中在2015年之后,主要涉及橄榄药用成分挖掘及其药理活性鉴定等;国内期刊发表的橄榄研究论文主要涵盖橄榄种质资源鉴定评价、药用成分提取与药理活性鉴定、高效栽培技术总结、果实品质鉴定与评价模型构建、采后贮藏保鲜、加工工艺研究以及分子生物学等,其中2010年以后发表的学术论文约占60%。在专利方面,主要涉及橄榄产品加工工艺、栽培技术、保鲜技术和分子生物学等领域。在标准方面,主要针对橄榄种质资源、栽培技术、品种审定和果品质量等,尤其近年来制定的行业标准《热带作物品种审定规范 第16部分:橄榄》和《热带作物品种试验技术规程 第16部分:橄榄》为橄榄品种选育提供了可供借鉴的参考依据,为橄榄产业可持续发展提供技术保障。在品种方面,现阶段橄榄品种的选育工作主要是各主产区根据各自产业发展需求选育的地方性品种,目前通过审认定的例如福建省的‘福榄1号’‘清榄1号’‘惠圆1号’‘惠圆2号’和‘惠圆3号’等,广东省的‘棱尖橄榄’,重庆市的‘江津白园橄榄’,广西壮族自治区的‘乌榄1号’等,这一系列优良品种的选育进一步推动了橄榄产业的发展。通过一系列研究集成的橄榄科技成果也获得了多项科技奖励,产生的经济、社会、生态效益较为显著。

2 研究进展

2.1 种质资源研究

橄榄属约75个种,在我国分布有7个种,包括橄榄(C. album)、方榄(C. bengalense)、小叶榄(C. parvum)、乌榄(C. pimela)、滇榄(C. strictum)、毛叶榄(C. subulatum)和越榄(C. tonkinense),具有栽培效益的主要是橄榄和乌榄。通常认为,中国是橄榄种质资源的起源地和遗传多样性分布中心,在福建、广东、广西、四川、重庆、贵州、云南、海南、浙江和台湾等南部省份和地区均有分布,其中以福建和广东分布最多[4]。1981年,邱武凌等[11]首先对福建传统橄榄种质资源进行调查,将福建橄榄分为闽侯品种系统(闽东地区)和莆田品种系统(莆仙地区),闽侯品种系统主要包括‘长营’‘惠圆’‘檀香’‘檀头’‘自来圆’‘长穗’‘长梭’‘羊矢’和‘黄大’,莆田品种系统主要包括‘下溪本’‘公本’‘刘族本’‘六分本’‘黄接本’‘一月本’‘厝后本’‘尖尾钻’‘黄柑味’‘黑肉鸡’和‘糯米橄榄’等。彭成绩等[12]调查发现,广东省主要橄榄种质资源包括‘茶窖榄’‘猪腰榄’‘鹰爪指’‘尖青’‘凤湖榄’‘三梭榄’‘冬节圆’‘大头黄’‘三方’‘黄仔’‘汕白榄’‘大红心’‘赤种’和‘红心仔’等。此外,张任之等[13]也对广东的乌榄种质资源进行了调查和记录。
福建省农业科学院果树研究所建立了农业农村部福州橄榄种质资源圃,收集保存了国内外橄榄种质资源200多份,涵盖了许多重要品种、传统品种和农家种,富有代表性和区域特色[14]。同时,制定了《橄榄种质资源描述规范和数据标准》(试行),对橄榄果实性状[15]、叶片表型[16]、花粉形态[17]、花序表型[18]、风味指标[19,20]、品质性状[21,22]和耐寒性[23]等性状进行鉴定评价,筛选出了‘光甜’‘甜榄1号’‘福榄2号’和‘瑞安3号’等一系列具有优质、早熟、丰产和抗寒等特性的橄榄种质,对我国橄榄育种和产业发展发挥了重要作用。广东橄榄资源的叶片结构[24]、果实外观性状[25]和营养成分[26]等鉴定评价也有相关报道。此外,利用果实[15]、花粉[17]、花序[18]和种子[27]等形态学,以及ISSR(inter-simple sequence repeat)[28]、RAPD(random amplified polymorphic DNA)[29]、SCAR(sequence characterized amplified regions)[30]、AFLP(amplified fragment length polymorphism)[31]、SRAP(sequence-related amplified polymorphism)[32]、ITS(internal transcribed spacer)[33]和SCoT(start codon targeted polymorphism)[34]等分子标记技术进行橄榄种质资源遗传分类和亲缘关系的研究也取得了较大进展。近年来,随着高通量测序技术的发展,第三代分子标记SNP(single nucleotide polymorphism)凭借其位点丰富、分布广泛和灵敏度准确性高等优点,开始应用于橄榄种质资源高密度遗传图谱构建和重要农艺性状相关位点鉴定,为解决橄榄遗传背景不明确、缺乏权威分类系统、同名异物或同物异名现象等问题提供了新的技术手段。

2.2 栽培技术研究

2.2.1 育苗与嫁接 20世纪80年代之前,橄榄一直沿用种植实生苗的有性繁殖形式繁衍后代,童期较长,一般定植7年后才开花结果。实生苗种植易发生变异,为了保持母树优良性状和缩短童期,橄榄传统的实生繁殖方法正逐步被小苗嫁接繁育所替代。橄榄育苗时常常存在种子发芽率、苗木整齐度和嫁接成活率等方面的问题,育苗是橄榄栽培技术探索的重要内容。研究发现,通过沸水煮烫橄榄果实,再采用氢氧化钠处理后快速分离种子,同时利用赤霉素浸泡再进行沙藏层积,可以充分提高橄榄种子的分离效率、萌发率和幼苗质量[35,36]
产业实践和研究发现,直接种植橄榄嫁接幼苗存在根系欠发达、早期生长缓慢和长势较弱等问题,难以满足生产需求。因此,目前生产上往往首先定植砧木,数年后再高位嫁接。在嫁接方法的选择上,嵌接和切接对成活率的影响不大,但嵌接的橄榄接穗长势更好,而且橄榄果园中的砧木往往较为粗壮,为方便操作和提高效率,橄榄高接换种也以嵌接为主[37]。近年来,我国橄榄主产区中土壤、气候环境和管理水平一致的果园中,不同砧木嫁接同一来源的橄榄接穗,其果实风味、质地、化渣程度和回甘程度等主要品质性状指标出现明显差异,说明不同类型橄榄砧木可能会影响接穗的生长与结果,开展试验验证并筛选配套砧穗组合是科研单位后续重要研究课题。
2.2.2 整形修剪与花果管理 自然条件下,橄榄顶端优势明显,产业上也常常因为缺乏整形修剪造成冠幅高大,影响日常管理和果实采摘。橄榄嫁接后管理对树体定型非常重要,可采用幼龄树主干截干,同时选留不同角度均匀分布的3个侧芽培育成主枝,秋梢停止生长后摘心促进当年生枝条成熟健壮,翌年同样在主枝上留3个健壮的均匀分布的侧芽培育成副主枝,第3年在副主枝上留2个或3个芽培育成大侧枝,形成主枝、副主枝和大侧枝的三级骨干分枝结构。近年来,橄榄整形修剪的相关探索还包括初投产期枝条修剪、盛产期结果枝与营养枝比例调整、老树回缩短截重新培育枝条、结果母枝修剪控制大小年等[5]
橄榄属于异花授粉植物且某些品种的雄能花无法满足自身雌能花的受精要求。因此,以雌能花为主的品种应套种或嫁接雄能花为主的品种作为授粉树,花粉萌发率低的品种可采用2,4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸或硼砂促进花粉萌发[38]。此外,橄榄果园中常存在幼果期异常落果现象,可喷施赤霉酸或芸苔素等为主要成分的保花保果药剂,但不同品种橄榄对这些药剂的敏感性差异非常大,药剂种类与浓度筛选及其对果实品质和产量的影响是下一阶段的重要研究工作。
2.2.3 病虫害防控 病虫害防控是橄榄生产过程中的关键环节。橄榄主要的病害包括叶斑病、叶枯病、灰斑病、煤烟病和炭疽病等,虫害主要有橄榄星室木虱、枯叶蛾、橄榄瘿螨、蛀果野螟、小直缘跳甲、橄榄皮细蛾和橄榄锄须丛螟等[5]。尤其是橄榄星室木虱,目前已成为我国橄榄主产区最主要的害虫,导致大量落叶、落花和落果,树势严重衰退。橄榄病虫害防控的关键在于早期监测预警,合理开展生物防治、物理防治和化学防治,同时加强树体管理提高抵御病虫能力[39]
2.2.4 抗寒栽培 低温冻害是长期以来困扰橄榄产业的重要难题。我国橄榄主要产区福建和浙江等地区均存在周期性橄榄冻害,严重威胁橄榄产业的持续稳定发展[4]。目前,橄榄抗寒的相关研究主要集中在防冻技术应用、灾后恢复、冻害危险性区域GIS(geographic information system)评估、品种抗寒性鉴定等[4]。通常认为,‒3 ℃是橄榄所能承受的极端临界低温,日极端低温‒3 ℃持续时间超过3 h,连续出现超过3 d均会导致橄榄冻害发生[40]。彭远琴等[41]最近的研究再次证实‘三棱榄’‘长营’‘惠圆’和‘檀香’等不同类型橄榄的低温半致死温度均介于‒2.79 ℃~ ‒3.76 ℃。近年来,橄榄抗寒分子机理的相关研究也不断深入[42,43,44],为橄榄抗寒育种奠定了良好的基础。

2.3 果实品质研究

橄榄果实品质研究一直是橄榄研究工作的重要内容之一。受市场影响,具有优异鲜食品质性状的橄榄市场价格是普通橄榄的数倍甚至数十倍,因此橄榄鲜食品质评价体系和模型的建立对产业的发展具有重要意义。根据行业标准《热带作物品种试验技术规程 第16部分:橄榄》,橄榄果实主要品质性状包含单果重、果实整齐度、果皮颜色、果肉颜色、果肉厚度、果肉质地、汁液量、化渣程度、涩味、回甘程度、可食率以及可溶性固形物、可溶性糖、总酸、维生素C、粗纤维、钙、单宁、总多酚、粗多糖和总黄酮含量等。其中,果肉质地、化渣程度、涩味和回甘程度等是《热带作物品种审定规范 第16部分:橄榄》规定的主要的鲜食品质感官分析指标。2010年以后,橄榄鲜食品质评价模型的构建也受到越来越多的关注。其中,林玉芳等[45]提出以多酚和总糖含量比值来区别甜橄榄、鲜食橄榄、鲜食加工两用橄榄和加工橄榄;池毓斌等[46]构建了以总多酚、可溶性总糖、可滴定酸和总游离氨基酸为主要评价指标的橄榄鲜食品质评价模型;孔祥佳等[47]通过研究确定了橄榄食用品质与采收期的关系。值得注意的是,感官分析结合模型评估仍是现行被广泛认可的橄榄鲜食品质评价方法[48]。此外,香气成分作为橄榄品质风味形成的重要影响因素,在‘三棱榄’‘冬节圆’‘长营’‘清榄1号’‘闽清2号’和‘灵峰橄榄’等品种(系)中已被广泛鉴定,揭示了橄榄香气组分骨架的主要物质[29,49-51]

2.4 保鲜加工研究

2.4.1 保鲜 橄榄的成熟期一般在10—12月,但春节期间橄榄的需求量最大,因此,橄榄采后贮藏保鲜尤其重要。橄榄贮藏过程中常常发生采后病害导致果实皱缩和腐烂,影响耐贮性,主要病害包括果腐病、曲霉病、煤烟病、青霉病、炭疽病、灰斑病、焦腐病和疫病等[7]。橄榄贮藏保鲜研究报道开始于1982年,赵汝证[52]首先开发了一种橄榄简易有效贮藏方法,无损伤果晾干后采用塑料薄膜袋分装,袋口折后压在果实下,置于阴凉处,定期剔除坏果。为切实解决橄榄产业面临的保鲜难题,福建农林大学、福建省亚热带植物研究所和闽清县农业局等分别开展了多菌灵、抑霉唑、戴唑霉等药剂对橄榄鲜果的保鲜效果研究,同时探讨了果实采收时期、采收方式、涂膜处理、冷藏温度、品种类型、包装技术和包装材料等因素对采后贮藏的影响[53,54,55,56,57,58,59]。此外,随着食品安全日益受到重视,天然保鲜剂或高效安全防腐剂在橄榄保鲜中的应用也越来越广泛,例如,Chen等[60]研究表明姜油树脂对橄榄果腐病主要病原菌Pestalotiopsis microspora具有很好的抑菌活性,周相助等[61]和叶清华等[62]也将女贞、竹叶和松针等的黄酮提取液作为天然保鲜剂应用于橄榄保鲜。近年来,本项目组也针对性开展了脱氢乙酸钠、山梨酸钾、异抗坏血酸钠和植物提取物补骨脂等高效安全防腐剂在橄榄鲜果中的保鲜效果研究。值得注意的是,低温冻害也是橄榄采后保鲜过程中需要重视的关键环节,贮藏温度会影响橄榄果实的呼吸强度、褐变指数、失重率、坏果率、多胺类物质含量和保护酶活性等,其中(8.5±0.5)℃是橄榄鲜果保鲜较适宜的贮藏温度[63,64]
2.4.2 加工 由于起步较晚、重视不足和科研投入较少等缘故,我国橄榄加工产业发展缓慢,橄榄营养成分与药用价值未能得到充分有效利用。传统的橄榄加工产品主要包括咸橄榄、橄榄醋、橄榄蜜饯和榄角等,其中咸橄榄、橄榄醋和橄榄蜜饯等传统加工产品因工艺简单,应用广泛,在早期橄榄产业中曾占据重要地位,其中最具有代表性的“大世界”橄榄蜜饯获得了福建名牌产品。然而,传统橄榄加工产品仍存在种类单一、利用率低、工艺落后、缺乏统一标准和存在安全性问题等不足,同时果实中的营养物质和功能成分流失严重,在橄榄加工产业中逐步被淘汰。近年来,新型橄榄加工产品,包括橄榄汁、橄榄茶、橄榄酒、橄榄咀嚼片和橄榄口服液等的研究和开发不断增强,各类型产品的加工工艺也得到不断优化[8]。例如,橄榄单宁含量高、苦涩味明显和酶促褐变严重等影响加工的限制因素逐步得到解决,加工的橄榄汁风味独特,酸甜可口,同时具有生津止渴和解酒保肝作用[65];茶叶浸提和浓缩形成的茶汁与橄榄汁及其他辅料调配以后形成的橄榄茶具有清火和养颜等效果[66];橄榄口服液和橄榄咀嚼片在很大程度上保留了橄榄营养物质和功能成分,具有清肺化痰、止咳定喘和抗氧化等功效,同时易于携带和食用[8, 67];橄榄果酒主要分为浸泡型和发酵型2种,近年来在果实种类筛选、工艺参数优化、品质风味鉴定和保健功效挖掘等方面均开展了相关研究,丰富了橄榄加工产品种类[68]。随着橄榄加工研究的深入,橄榄胶囊、粉剂和面包等新型产品也逐步得到应用,利用橄榄的抗氧化活性制作食品保鲜剂、防腐剂和抗氧化剂等的相关研究也在逐步展开。此外,乌榄的果核还常常被加工成核雕,作为我国特有的工艺品具有很高的艺术价值[69]

2.5 药理活性研究

橄榄富含多种功能成分和药理活性物质,是我国传统中药材,其皮、根、茎、叶、花和果等均可入药,同时橄榄是国家卫生健康委员会发布的《按照传统既是食品又是中药材的物质目录》规定的药食同源食品。1997年,傅遍红等[70]首先研究报道了橄榄中的黄酮类物质具有较强的抑菌防腐作用。随后,橄榄功能成分提取纯化工艺优化和药理活性鉴定的相关研究越来越广泛,主要集中在多酚类物质、黄酮类化合物、挥发性物质、三萜类化合物、香豆精、脂肪酸、氨基酸和矿质元素等几个大类[71,72,73]。主要的药理作用包括保肝护肝、抗菌消炎、调节血脂、降血糖、抗氧化、增强机体免疫、抗肿瘤、抗病毒和助消化等[9]。例如,单宁[74]、多糖[75]和石油醚[76]具有良好的抗氧化效果,没食子酸[77]具有清除自由基的活性,乙酸乙酯[78]和鞣花酸[79]可用于抗HIV和乙型肝炎病毒,短叶苏木酚酸甲酯[80]、异柯里拉京[81]和二氢红花菜豆酸[82]可有效抑制流感病毒活性,多酚[83]能改善机体肠道内的微生物群落组成,乙酸乙酯[84,85,86]可抗菌消炎、预防肥胖和缓解糖尿病,咖啡酸壬基酯[87]具有良好的抗菌作用。此外,橄榄对神经炎症相关疾病也具有较好的疗效[88]。近年来,橄榄功能成分的相关研究越来越系统和深入,体现在橄榄功能成分的高效稳态化提取工艺开发、药用成分分离纯化与理化性质检测、药理活性鉴定、功能性产品研发、高功能成分种质筛选与生物合成机理解析等各个方面,为橄榄产业创新发展与转型升级奠定了重要基础[89]

2.6 生物技术研究

2.6.1 植物组织培养 橄榄外植体易受酚类物质和多酚氧化酶活性影响,因此,橄榄组织培养时外植体材料易发生褐变,组织培养的难度较大[90]。在已有的研究中,蔡汉权[91]首先报道了橄榄胚培养技术。随后,橄榄幼胚培养[92,93]、成熟胚培养[94]、下胚轴愈伤组织培养[95]和花药愈伤组织培养[96]等均有陆续报道。然而,由于橄榄离体培养材料极易褐变,增殖系数低,继代培养难度大等技术瓶颈,后续橄榄的离体培养研究工作几乎停滞。
2.6.2 分子生物学 与其他大宗果树相比,橄榄分子生物学相关研究起步较晚,深度较浅,进展较缓慢。2005年,聂珍素等[97,98]和陈瑞庆[99]首先开展了橄榄分子生物学研究,对橄榄基因组DNA进行提取并对RAPD扩增条件展开优化。随后,ISSR[28]、SCAR[30]、AFLP[31]、SRAP[32]、ITS[33]和SCoT[34]等分子标记技术被广泛应用于橄榄种质资源鉴定和亲缘关系研究。
在基因挖掘和分子机理探索方面,从美国生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)检索发现,目前已经挖掘和验证的橄榄核酸序列主要包括一些功能基因或转录因子,例如ABRABA-responsive protein)、ERFEthylene responsive factor)、WRKYWRKY transcription factor)、ICE1Inducer of CBF expression)、PPOPolyphenol oxidase)、CABChlorophyll A/B binding protein)、F3HFlavanone 3-hydroxylase)、GSGlutamine synthetase)、FLSFlavonol synthase)、CHSChalcone synthase)、PALPhenylalanine ammonia-lyase)、CHIChalcone isomerase)、4CL4-coumarate:CoA ligase)、C4HCinnamate-4-hydroxylase)、NIRNitrate reductase)等,涉及类黄酮代谢、乙烯代谢和逆境胁迫等生物过程。此外,还有橄榄叶绿体基因组和部分叶绿体基因。橄榄分子生物学的相关报道主要集中在低温胁迫响应[19,20,21]、细胞壁代谢[100]、酚类物质代谢[101]、类黄酮生物合成[102,103]和金丝桃苷生物合成[104]等,通过转录组高通量测序或关键基因挖掘与表达谱验证阐释其分子机制。其中的部分结果也推动了其他作物类似的研究工作,例如橄榄PPO基因的获得为其他热带作物该基因的同源克隆提供了重要的数据参考。此外,橄榄密码子编码特征[105,106]和叶绿体基因组[107,108]的相关研究也有报道,为揭示橄榄遗传进化规律奠定了基础。近年来,本项目组也分别以传统橄榄种质和耐寒种质作为对照组和试验组进行低温胁迫处理,采用mRNA和miRNA高通量测序并进行联合分析,构建了较为可靠且具有较高参考价值的mRNA和miRNA文库,通过比较分析发现,橄榄抗寒响应涉及多种代谢途径和信号通路,尤其是激素信号转导在其中起到了重要作用,结果进一步丰富了橄榄分子生物学研究内容。

3 发展趋势与展望

3.1 加快优良品种培育

长期以来,橄榄品种选育工作相对滞后,由于缺乏严格的品种比较试验、品种区域试验和品种生产试验,限制了许多具有优良性状的橄榄地方性品种的推广应用。在后续研究中,一方面,要加大橄榄种质资源调查收集和鉴定评价力度,深度挖掘和创新利用橄榄种质资源,筛选一批优良的橄榄育种新材料,同时基于橄榄种质资源开展重要农艺性状相关分子标记开发和优异基因鉴定研究,用于育种材料早期鉴定和定向育种,提高育种效率;另一方面,立足橄榄产业发展需求加强鲜食、加工、高功能成分、抗逆等不同育种目标的橄榄新品种选育工作,加大橄榄良种的利用和推广力度。此外,还应重视橄榄杂交育种、诱变育种和分子育种等相关技术的积累,为橄榄优良品种的培育奠定坚实的基础。

3.2 加大基础研究力度

与其他果树相比,橄榄属于小宗果树,其科学研究起步较晚,基础研究薄弱,后续应着重开展以下几个方面的研究工作。(1)在种质资源评价方面,应加强橄榄种质资源高产、优质、广适和多抗等重要性状的研究,开展种质资源表型与基因型的精准鉴定评价,以及优异种质和优异基因的深度发掘;(2)在遗传背景探索方面,采用SNP等新一代分子标记技术开展种质资源研究,构建分子指纹图谱库,解析橄榄种质资源遗传背景,构建权威的橄榄分类系统,解决橄榄产业普遍存在的同名异物或同物异名现象,对橄榄重要农艺性状相关的位点进行QTL(quantitative trait locus)定位,为橄榄分子辅助育种提供重要参考;(3)在分子机理解析方面,橄榄属于典型的药食两用作物,其功能成分合成和代谢机理,以及药理活性机制也是接下来研究的重点;(4)基于橄榄产业面临的实际问题,利用抗性资源挖掘抗寒和抗病相关基因或转录因子,研究抗性形成的分子机理,进一步指导橄榄育种和抗性栽培。目前,基因组学、代谢组学和基因编辑等前沿生物技术手段在橄榄研究中的应用仍未见报道,转录组学相关研究也很有限,橄榄基础研究力度仍有待加强。

3.3 创新产业关键技术

我国橄榄分布区域生态类型和气候特征差异很大,针对性研发橄榄实用关键技术对产业的稳定发展意义重大,需要着重开展以下几个方面的研究工作。(1)更新栽培技术提高生产效率和降低生产成本,例如矮化栽培、采果装置和分级装置研发、配方施肥、防寒防冻技术开发、保花保果技术应用、专用保鲜剂开发等,同时积极探索橄榄栽培新模式,在山地果园中整合间作技术、立体种养和生草栽培等建立山地橄榄生态果园;(2)开发病虫害绿色防控技术减少产业上普遍存在的大剂量高频率使用农药现象,针对橄榄主要病虫害建立科学预警机制,总结和推广绿色防控技术,避免生产者盲目喷施农药,同时加大力度研究生物防治的可行性和应用模式;(3)防控区域生产风险,加大力度研究橄榄生物学特性对区域生态、气候、土壤和环境条件的要求,例如耐寒性、抗病性、土壤适应性等,建立数据模型和科学的评价机制,合理布局,因地制宜发展橄榄产业;(4)在橄榄种苗、果实等级规格、嫁接育苗技术、栽培技术和主要病虫害防控技术等方面建立标准技术体系,从每个环节规范橄榄的栽培管理,为产业提供技术指导,保证橄榄果实产量质量。

3.4 挖掘功能成分与研发精深加工产品

橄榄鲜食市场相对狭小,且已逐步趋向饱和,充分挖掘橄榄的功能成分和研发精深加工产品是未来橄榄产业重要的发展方向。橄榄功能成分挖掘与精深加工产品研发应着力考虑以下几个方面内容。(1)目前虽已证明橄榄的功能性成分具有重要的药理活性,但许多作用机制尚不明确,需要进一步加大力度研究功能性成分的化学结构及其在具体病理上的调节机制与疗效,同时明确不同成分可能产生的副作用并开展毒理学研究,为真正产业化应用奠定基础;(2)橄榄功能成分研究多以不同种类研究为主,同一种类成分不同单体的结构、理化性质、功能及相互间的构效和量效关系尚不明确,且不同种类成分之间可能具有相同的药理活性,例如橄榄多酚和多糖都具有抗氧化作用,二者之间存在拮抗或是协同作用,这些都有待进一步深入研究;(3)应探究影响这些功能性成分作用效能可能存在的外界因素,研究加工工艺、存储条件和使用方式等对这些成分的影响,在确保安全卫生的前提下,优化各个环节尽可能不破坏活性成分的营养和保健价值;(4)开展橄榄保健食品的安全性评价及研究,使其功能性成分挖掘与精深加工产品研发具有真正应用和推广价值。

3.5 应用农业大数据

橄榄的栽培效益对精细化程度要求较高,如何实现农业大数据服务于橄榄产业也是今后重要的研究课题,主要包括以下几个方面内容。一是产区生态环境大数据,例如水气光温土等;二是橄榄田间性状大数据,例如花芽分化、抽梢、开花、结果、成熟和病虫害等;三是橄榄生产环节大数据,例如品种、产量、价格和投入等。通过系统研究,建立生态环境大数据、田间性状大数据与生产环节大数据间的关联分析模型,实现对橄榄产业的精确预测和定位,指导橄榄产业发展。
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