Chinese Journal of Tropical Crops ›› 2019, Vol. 40 ›› Issue (4): 724-730.DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.04.015
• Biotechnology and Tissue Cultures • Previous Articles Next Articles
WEI Aiyu,XU Yingyan,YANG Ningye,JIANG Lin,HU Jihong,YANG Huiting,CAI Canjun,CHEN Jianjun,CHEN Guixin(),PAN Dongming()
Received:
2018-07-28
Revised:
2019-01-22
Online:
2019-04-15
Published:
2019-05-21
Contact:
Guixin CHEN,Dongming PAN
WEI Aiyu,XU Yingyan,YANG Ningye,JIANG Lin,HU Jihong,YANG Huiting,CAI Canjun,CHEN Jianjun,CHEN Guixin,PAN Dongming. In Vitro Propagation of Codiaeum variegatum ‘Golden Queen’[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2019, 40(4): 724-730.
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URL: http://www.rdzwxb.com/EN/10.3969/j.issn.1000-2561.2019.04.015
编号 No. | 酒精消毒时间 Alcohol treatment time/s | 升汞消毒时间 Mercuric chloride treatment time/min | 污染率 Pollution rate/% | 枯死率 Dead rate/% | 成活率 Survival rate/% |
---|---|---|---|---|---|
1 | 10 | 8 | 61.53 | 0.00 | 38.47 |
2 | 20 | 8 | 57.34 | 0.00 | 42.66 |
3 | 30 | 8 | 52.60 | 0.00 | 47.40 |
4 | 10 | 10 | 37.50 | 1.11 | 61.39 |
5 | 20 | 10 | 25.80 | 3.50 | 70.70 |
6 | 30 | 10 | 22.63 | 4.60 | 72.77 |
7 | 10 | 12 | 16.67 | 14.10 | 69.23 |
8 | 20 | 12 | 7.00 | 20.00 | 68.90 |
9 | 30 | 12 | 3.00 | 47.00 | 50.00 |
Tab. 1 Effect of different disinfection methods on survival rate of primary culture
编号 No. | 酒精消毒时间 Alcohol treatment time/s | 升汞消毒时间 Mercuric chloride treatment time/min | 污染率 Pollution rate/% | 枯死率 Dead rate/% | 成活率 Survival rate/% |
---|---|---|---|---|---|
1 | 10 | 8 | 61.53 | 0.00 | 38.47 |
2 | 20 | 8 | 57.34 | 0.00 | 42.66 |
3 | 30 | 8 | 52.60 | 0.00 | 47.40 |
4 | 10 | 10 | 37.50 | 1.11 | 61.39 |
5 | 20 | 10 | 25.80 | 3.50 | 70.70 |
6 | 30 | 10 | 22.63 | 4.60 | 72.77 |
7 | 10 | 12 | 16.67 | 14.10 | 69.23 |
8 | 20 | 12 | 7.00 | 20.00 | 68.90 |
9 | 30 | 12 | 3.00 | 47.00 | 50.00 |
编号 No. | 6-BA/(mg·L-1) | IBA/(mg·L-1) | 平均有效芽数 Average effective bud number | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|
1 | 0.5 | 0.1 | 0.79±0.044gG | 芽点弱,叶黄绿色,部分枯死 |
2 | 0.5 | 0.2 | 1.37±0.026fFED | 顶芽萌生,叶黄绿色,诱导率低且慢 |
3 | 0.5 | 0.5 | 0.86±0.066gGF | 部分有愈伤组织产生,芽弱,叶嫩绿 |
4 | 1.0 | 0.1 | 1.28±0.23fGFE | 腋芽萌生,芽点黄绿色,外植体部分枯萎 |
5 | 1.0 | 0.2 | 1.60±0.22fDE | 部分有愈伤组织产生,芽点嫩绿、瘦弱 |
6 | 1.0 | 0.5 | 1.84±0.25deCD | 基部有少量深绿色愈伤组织,有效芽少、细弱 |
7 | 1.5 | 0.1 | 2.15±0.17cdCD | 芽点黄绿,基部黄化 |
8 | 1.5 | 0.2 | 2.33±0.03bcBC | 部分产生愈伤组织,叶片黄绿色 |
9 | 1.5 | 0.5 | 2.50±0.23bcB | 基部有深绿色愈伤组织,叶黄绿色,有效芽少 |
10 | 2.0 | 0.1 | 2.67±0.48bB | 顶芽、腋芽萌生,芽长势一般 |
11 | 2.0 | 0.2 | 3.75±0.33aA | 产生少量愈伤组织,芽点多,叶绿,新芽健壮 |
12 | 2.0 | 0.5 | 2.20±0.20cdBC | 基部有少量深绿色愈伤组织,有效芽 |
Tab. 2 Effects of plant growth regulators on the induction of buds on the primary generation
编号 No. | 6-BA/(mg·L-1) | IBA/(mg·L-1) | 平均有效芽数 Average effective bud number | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|
1 | 0.5 | 0.1 | 0.79±0.044gG | 芽点弱,叶黄绿色,部分枯死 |
2 | 0.5 | 0.2 | 1.37±0.026fFED | 顶芽萌生,叶黄绿色,诱导率低且慢 |
3 | 0.5 | 0.5 | 0.86±0.066gGF | 部分有愈伤组织产生,芽弱,叶嫩绿 |
4 | 1.0 | 0.1 | 1.28±0.23fGFE | 腋芽萌生,芽点黄绿色,外植体部分枯萎 |
5 | 1.0 | 0.2 | 1.60±0.22fDE | 部分有愈伤组织产生,芽点嫩绿、瘦弱 |
6 | 1.0 | 0.5 | 1.84±0.25deCD | 基部有少量深绿色愈伤组织,有效芽少、细弱 |
7 | 1.5 | 0.1 | 2.15±0.17cdCD | 芽点黄绿,基部黄化 |
8 | 1.5 | 0.2 | 2.33±0.03bcBC | 部分产生愈伤组织,叶片黄绿色 |
9 | 1.5 | 0.5 | 2.50±0.23bcB | 基部有深绿色愈伤组织,叶黄绿色,有效芽少 |
10 | 2.0 | 0.1 | 2.67±0.48bB | 顶芽、腋芽萌生,芽长势一般 |
11 | 2.0 | 0.2 | 3.75±0.33aA | 产生少量愈伤组织,芽点多,叶绿,新芽健壮 |
12 | 2.0 | 0.5 | 2.20±0.20cdBC | 基部有少量深绿色愈伤组织,有效芽 |
培养基 Culture medium | 增殖方式 Proliferation mode | 增殖系数 Proliferation coefficient | 株高 Plant height/cm | 叶宽 Leaf width/cm | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|
ER | 腋芽增殖 | 5.06±2.27bB | 1.20±0.037aA | 0.18±0.04bA | 芽细小,节间长,茎尖叶黄绿 |
WPM | 腋芽增殖 | 4.33±0.58bB | 0.96±0.15bA | 0.23±0.02bA | 芽细小,节间长,叶细长、嫩绿 |
MS | 侧芽增殖 | 10.77±0.25aA | 0.94±0.14bA | 0.31±0.01aA | 芽健壮,节间适中,叶绿 |
Tab. 3 Effects of different basic media on subculture proliferation
培养基 Culture medium | 增殖方式 Proliferation mode | 增殖系数 Proliferation coefficient | 株高 Plant height/cm | 叶宽 Leaf width/cm | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|
ER | 腋芽增殖 | 5.06±2.27bB | 1.20±0.037aA | 0.18±0.04bA | 芽细小,节间长,茎尖叶黄绿 |
WPM | 腋芽增殖 | 4.33±0.58bB | 0.96±0.15bA | 0.23±0.02bA | 芽细小,节间长,叶细长、嫩绿 |
MS | 侧芽增殖 | 10.77±0.25aA | 0.94±0.14bA | 0.31±0.01aA | 芽健壮,节间适中,叶绿 |
Fig. 1 Growth of Codiaeum variegatum ‘Golden Queen’on different basic media A: Clustered shoots proliferating on WPM+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L; B: Clustered shoots proliferating on ER+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L; C: Clustered shoots proliferating on MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L.
Fig. 2 Four different proliferating stages of Codiaeum variegatum ‘Golden Queen’ A: Tissue culture seedling cultured in medium MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L for 10 d; B: Tissue culture seedling cultured in medium MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L for 20 d; C: Tissue culture seedling cultured in medium MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L for 30 d; D: Tissue culture seedling cultured in medium MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L for 60 d.
编号 No. | 6-BA/ (mg·L-1) | NAA/ (mg·L-1) | IBA/ (mg·L-1) | 增殖系数 Proliferation coefficient | 株高均值 Mean value of plant height/cm | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|---|
1 | 1.0 | 0.2 | 0.0 | 10.77±0.25aA | 0.94±0.14aA | 叶深绿,长势良好,丛生芽多,密 |
2 | 1.0 | 0.0 | 0.2 | 10.47±2.70aA | 0.85±0.07abAB | 叶绿,长势较好 |
3 | 1.5 | 0.2 | 0.0 | 6.39±0.34bB | 0.65±0.05bcBC | 叶色偏黄,长势较差,芽分化少 |
4 | 1.5 | 0.0 | 0.2 | 6.50±0.50bB | 0.60±0.10bcC | 叶色偏黄,叶片卷曲,长势较差 |
5 | 2.0 | 0.2 | 0.0 | 8.50±0.50abAB | 1.00±0.11aABC | 叶色偏黄,长势一般 |
6 | 2.0 | 0.0 | 0.2 | 6.83±0.76bB | 0.58±0.10cC | 叶色嫩绿,长势较差 |
Tab. 4 Effect of different hormone combinations on subculture multiplication
编号 No. | 6-BA/ (mg·L-1) | NAA/ (mg·L-1) | IBA/ (mg·L-1) | 增殖系数 Proliferation coefficient | 株高均值 Mean value of plant height/cm | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|---|
1 | 1.0 | 0.2 | 0.0 | 10.77±0.25aA | 0.94±0.14aA | 叶深绿,长势良好,丛生芽多,密 |
2 | 1.0 | 0.0 | 0.2 | 10.47±2.70aA | 0.85±0.07abAB | 叶绿,长势较好 |
3 | 1.5 | 0.2 | 0.0 | 6.39±0.34bB | 0.65±0.05bcBC | 叶色偏黄,长势较差,芽分化少 |
4 | 1.5 | 0.0 | 0.2 | 6.50±0.50bB | 0.60±0.10bcC | 叶色偏黄,叶片卷曲,长势较差 |
5 | 2.0 | 0.2 | 0.0 | 8.50±0.50abAB | 1.00±0.11aABC | 叶色偏黄,长势一般 |
6 | 2.0 | 0.0 | 0.2 | 6.83±0.76bB | 0.58±0.10cC | 叶色嫩绿,长势较差 |
Fig. 3 Rooting effect of rootless explants in medium 1/2MS+ NAA 1.5 mg/L and 1/2MS+ IBA 1.5 mg/L A: Rootless seedlings were rooted on 1/2MS+NAA 1.5 mg/L medium for 15 d; B: Rootless seedlings were rooted on 1/2MS+IBA 1.5 mg/L medium for 15 d; C: Rootless seedlings were rooted on 1/2MS+NAA 1.5 mg/L medium for 30 d; D: Rootless seedlings were rooted on 1/2MS+IBA1.5 mg/L medium for 30 d.
编号 No. | IBA /(mg·L-1) | NAA /(mg·L-1) | 生根率 Rooting rate/% | 根数均值 Average root number | 根长均值 Average root length/cm | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|---|
1 | 0.5 | 0.0 | 100.00±0.00aA | 5.33±0.76bB | 2.07±0.25bB | 愈伤组织较少,根细长 |
2 | 1.0 | 0.0 | 84.33±4.04bB | 6.00±0.62bB | 2.10±0.10bB | 断根状,有脱叶,根部褐化,根细 |
3 | 1.5 | 0.0 | 100.00±0.00aA | 8.00±0.50aA | 2.83±0.15aA | 愈伤组织较少,根壮 |
4 | 2.0 | 0.0 | 74.67±9.30cC | 7.28±0.25aA | 1.77±0.21bcB | 少量有棉絮状块体、产生愈伤组织,短粗 |
5 | 0.0 | 0.5 | 77.33±9.29bcB | 5.17±0.76bB | 1.40±0.20cdCD | 断根状,棉絮块体,有愈伤组织,根细短 |
6 | 0.0 | 1.0 | 44.00±1.00dC | 2.97±0.45cC | 1.13±0.20dD | 断根状,部分脱叶,根多、细短 |
7 | 0.0 | 1.5 | 31.33±3.21eD | 2.04±0.27dCD | 1.33±0.31dCD | 无根尖,有断根,褐化,根细 |
8 | 0.0 | 2.0 | 17.33±2.52fE | 1.07±0.15eD | 1.70±0.21dD | 脱叶严重,根细 |
Tab. 5 Effect of different concentration of IBA or NAA on Rooting
编号 No. | IBA /(mg·L-1) | NAA /(mg·L-1) | 生根率 Rooting rate/% | 根数均值 Average root number | 根长均值 Average root length/cm | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|---|
1 | 0.5 | 0.0 | 100.00±0.00aA | 5.33±0.76bB | 2.07±0.25bB | 愈伤组织较少,根细长 |
2 | 1.0 | 0.0 | 84.33±4.04bB | 6.00±0.62bB | 2.10±0.10bB | 断根状,有脱叶,根部褐化,根细 |
3 | 1.5 | 0.0 | 100.00±0.00aA | 8.00±0.50aA | 2.83±0.15aA | 愈伤组织较少,根壮 |
4 | 2.0 | 0.0 | 74.67±9.30cC | 7.28±0.25aA | 1.77±0.21bcB | 少量有棉絮状块体、产生愈伤组织,短粗 |
5 | 0.0 | 0.5 | 77.33±9.29bcB | 5.17±0.76bB | 1.40±0.20cdCD | 断根状,棉絮块体,有愈伤组织,根细短 |
6 | 0.0 | 1.0 | 44.00±1.00dC | 2.97±0.45cC | 1.13±0.20dD | 断根状,部分脱叶,根多、细短 |
7 | 0.0 | 1.5 | 31.33±3.21eD | 2.04±0.27dCD | 1.33±0.31dCD | 无根尖,有断根,褐化,根细 |
8 | 0.0 | 2.0 | 17.33±2.52fE | 1.07±0.15eD | 1.70±0.21dD | 脱叶严重,根细 |
编号 No. | 泥炭土 Peat soil | 沙 Sand | 蛭石 Vermiculite | 成活率 Survival ratio/% | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|
1 | 1 | 1 | 1 | 60.0 | 长势差,叶片脱落 |
2 | 0 | 1 | 1 | 88.0 | 长势较好,叶色偏黄 |
3 | 3 | 1 | 1 | 90.0 | 长势良好,叶绿 |
Tab. 6 Effects of substrate types and ratios on transplanting rooting seedlings
编号 No. | 泥炭土 Peat soil | 沙 Sand | 蛭石 Vermiculite | 成活率 Survival ratio/% | 生长状况 Growth state |
---|---|---|---|---|---|
1 | 1 | 1 | 1 | 60.0 | 长势差,叶片脱落 |
2 | 0 | 1 | 1 | 88.0 | 长势较好,叶色偏黄 |
3 | 3 | 1 | 1 | 90.0 | 长势良好,叶绿 |
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