Establishment of a Tissue Culture System for Wild Polygonatum cyrtonema Hua in Sanming

doi:10.3969/j.issn.1000-2561.2019.08.015

Abstract

Abstract:

An aseptic tissue culture procedure was established for wild Polygonatum cyrtonema Hua in Samming by optimizing the disinfection and the adventitious bud induction procedures, in which the tubers from wild-growing plants were used as the explants. The best sterilization procedure for the explants was as follows: brushed soils off the tubers in clear water with a soft toothbrush; cleaned within diluted detergent for 16 hours; soaked in 3% carbendazim for 2 days (shaked intermittently) and washed in water to remove the residual carbendazim from the surface; dried on filter paper for 5 h; dipped first in 75% alcohol for 30 s and then in 0.2% mercuric chloride for 15 min, which resulted in a contamination rate of only 20.2%. Comparatively, the explants from March to April were significantly better than those from November to December in both the growth and the induction of adventitious buds. The optimal medium for the adventitious bud induction of the wild P. cyrtonema Hua explants was: MS+6-BA 4.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L, and the budding rate on the medium was as high as 88.0%.

Key words: wild Polygonatum cyrtonema Hua, sterile system, tissue culture, adventitious bud induction

CLC Number:

S961.6

LYU Yumeng,XU Xiaoping,ZHANG Shuting,GUO Zhipeng,WANG Jinfeng,LIN Yuling,WANG Tianchi,LAI Zhongxiong. Establishment of a Tissue Culture System for Wild Polygonatum cyrtonema Hua in Sanming[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2019, 40(8): 1559-1564.

Figures/Tables 8

References 29

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处理 Treatment	处理方法 Pretreatmengts
1	野生黄精根状茎去除须根,用软毛牙刷在清水下洗去野生黄精根状茎表面的泥土,再采用3%多菌灵浸泡3 d,期间时常震荡摇晃,在清水下用软毛牙刷清洗根状茎表面残留的多菌灵,盛放于瓷杯中,获得正式消毒前的外植体。
2	将根状茎用软毛牙刷在清水下洗去野生黄精根状茎表面的泥土后,不加多菌灵表面预消毒,晾干3 d,获得消毒前外植体备用。
3	将根状茎用软毛牙刷在清水下洗去野生黄精根状茎表面的泥土,先用洗衣粉在自来水下开到最大,冲洗16 h,再用3%多菌灵浸泡2 d,期间时常震荡摇晃,在清水下用软毛牙刷清洗根状茎表面残留的多菌灵,在滤纸上晾放5 h后进行外植体消毒。

处理 Treatment	处理方法 Pretreatmengts
1	野生黄精根状茎去除须根,用软毛牙刷在清水下洗去野生黄精根状茎表面的泥土,再采用3%多菌灵浸泡3 d,期间时常震荡摇晃,在清水下用软毛牙刷清洗根状茎表面残留的多菌灵,盛放于瓷杯中,获得正式消毒前的外植体。
2	将根状茎用软毛牙刷在清水下洗去野生黄精根状茎表面的泥土后,不加多菌灵表面预消毒,晾干3 d,获得消毒前外植体备用。
3	将根状茎用软毛牙刷在清水下洗去野生黄精根状茎表面的泥土,先用洗衣粉在自来水下开到最大,冲洗16 h,再用3%多菌灵浸泡2 d,期间时常震荡摇晃,在清水下用软毛牙刷清洗根状茎表面残留的多菌灵,在滤纸上晾放5 h后进行外植体消毒。

培养基序号 Medium number	6-BA浓度 6-BA concentration/(mg·L^-1)	培养基 Medium type
1	2.0	MS+NAA 0.2 mg/L+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH 5.8
2	4.0
3	6.0
4	10.0

培养基序号 Medium number	6-BA浓度 6-BA concentration/(mg·L^-1)	培养基 Medium type
1	2.0	MS+NAA 0.2 mg/L+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH 5.8
2	4.0
3	6.0
4	10.0

处理 Treatment	外植体数 Explant number	污染率 Contamination rate/%
1	60	53.8
2	60	89.1
3	60	34.6