An Open in vitro Culture System for Rapid Propagation of Cut Flower Chrysanthemum cv Iwanohakusen

doi:10.3969/j.issn.1000-2561.2019.08.014

Abstract

Abstract:

An open in vitro culture system was established for the rapid propagation of cut flower Chrysanthemum ‘Iwanohakusen’, in which the best explant surface sterilization agent and the best microorganism growth inhibiting agents were screened out. The best explant surface sterilization was obtained by gently shaking the explants in 0.1% (V/V) of sodium hypochlorite for 15 min. The best result for inhibiting the growth of microorganisms in the primary culture stage was achieved by adding 50 mg/L of mancozeb, 0.1% (V/V) of sodium hypochlorite and 5 mg/L of potassium sorbate, into the medium, and under the condition the contamination rate was as low as 36.7%. There was no significant differences in the induction and the growth rates of the adventitious buds between the traditional tissue culture system and the open culture system. The best combination of the microorganism growth inhibiting agents was 40 mg/L of mancozeb, 0.1% (V/V) sodium hypochlorite and 5 mg/L of potassium sorbate at the stages of subculture and the rooting in the open system, and a high bud multiplication efficiency of 5.93% and a rooting rate of 80.0% were achieved at the condition, without any significant difference in bud growth compared to the conventional tissue culture system.

Key words: cut flower Chrysanthemum ‘Iwanohakusen’ (Chrysanthemum cv. Iwanohakusen), open rapid propagation in vitro, bacteriostatic agents

CLC Number:

Q813.1

ZHU Mengzhu,YANG Huiting,HU Jihong,TAN Yanli,HONG Rongqin,LIN Qingliang,PAN Dongming,KANG Jianban,SHE Wenqin,CHEN Guixin. An Open in vitro Culture System for Rapid Propagation of Cut Flower Chrysanthemum cv Iwanohakusen[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2019, 40(8): 1551-1558.

Figures/Tables 9

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开放式培养阶段 Open culture stage	处理 Treatment	山梨酸钾 Potassium sorbate/(mg·L^-1)	代森锰锌 Mancozeb/ (mg·L^-1)	次氯酸钠 Sodium hypochlorite/%	琼脂 Agar/(g·L^-1)	蔗糖 Sucrose/ (g·L^-1)
初代培养 Primary culture (MS+1.0 mg/L 6-BA+ 0.1mg/L NAA)	1	5	50	0.008	4.5	30
	2	5	80	0.010
	3	5	150	0.012
	4	8	50	0.010
	5	8	80	0.012
	6	8	150	0.008
	7	10	50	0.012
	8	10	80	0.008
	9	10	150	0.010
继代培养/生根培养 Subculture (MS+1.5 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA) /rooting culture (1/2 MS+0.1 mg/L NAA)	1	5	10	0.010	4.5	继代培养30 /生根培养15
	2	5	20	0.010
	3	5	30	0.010
	4	5	40	0.010
	5	5	50	0.010
	6	5	60	0.010

开放式培养阶段 Open culture stage	处理 Treatment	山梨酸钾 Potassium sorbate/(mg·L^-1)	代森锰锌 Mancozeb/ (mg·L^-1)	次氯酸钠 Sodium hypochlorite/%	琼脂 Agar/(g·L^-1)	蔗糖 Sucrose/ (g·L^-1)
初代培养 Primary culture (MS+1.0 mg/L 6-BA+ 0.1mg/L NAA)	1	5	50	0.008	4.5	30
	2	5	80	0.010
	3	5	150	0.012
	4	8	50	0.010
	5	8	80	0.012
	6	8	150	0.008
	7	10	50	0.012
	8	10	80	0.008
	9	10	150	0.010
继代培养/生根培养 Subculture (MS+1.5 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA) /rooting culture (1/2 MS+0.1 mg/L NAA)	1	5	10	0.010	4.5	继代培养30 /生根培养15
	2	5	20	0.010
	3	5	30	0.010
	4	5	40	0.010
	5	5	50	0.010
	6	5	60	0.010

处理 Treatment	次氯酸钠 Sodium hypochlorite /%	消毒时间 Disinfection time/min	污染率 Pollution rate/%				成活率 Survival rate/%				生长情况 Growing situation
处理 Treatment	次氯酸钠 Sodium hypochlorite /%	消毒时间 Disinfection time/min	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	均值 Average value	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	均值 Average value	生长情况 Growing situation
1	0.5	10	70.0	56.7	63.3	63.3±6.65^abA	23.3	30.0	30.0	27.8±3.86^bB	长势一般,芽有轻微枯萎
2	0.5	15	56.7	63.3	60.0	60.0±3.30^abcA	30.0	20.0	23.3	24.4±5.09^bB	长势一般,芽轻微枯萎
3	0.5	20	46.7	43.3	40.0	43.3±3.35^dB	13.3	16.7	10.0	13.3±3.35^cB	长势差,芽枯萎严重
4	0.1	10	60.0	70.0	63.3	64.4±5.09^aA	26.7	23.3	30.0	26.7±3.35^bB	长势好,芽浓绿无枯萎
5	0.1	15	50.0	56.7	53.3	53.3±3.35^abcdAB	46.7	43.3	50.0	46.7±3.35^aA	长势好,芽浓绿无枯萎
6	0.1	20	50.0	46.7	53.3	50.0±3.30^cdAB	46.7	40.0	43.3	43.3±3.35^aA	长势一般,芽浓绿无枯萎
CK	0.1%升汞	5	40.0	53.3	63.3	52.2±11.68^bcdAB	60.0	46.7	36.7	47.8±11.68^aA	长势好,芽浓绿无枯萎

处理 Treatment	次氯酸钠 Sodium hypochlorite /%	消毒时间 Disinfection time/min	污染率 Pollution rate/%				成活率 Survival rate/%				生长情况 Growing situation
处理 Treatment	次氯酸钠 Sodium hypochlorite /%	消毒时间 Disinfection time/min	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	均值 Average value	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	均值 Average value	生长情况 Growing situation
1	0.5	10	70.0	56.7	63.3	63.3±6.65^abA	23.3	30.0	30.0	27.8±3.86^bB	长势一般,芽有轻微枯萎
2	0.5	15	56.7	63.3	60.0	60.0±3.30^abcA	30.0	20.0	23.3	24.4±5.09^bB	长势一般,芽轻微枯萎
3	0.5	20	46.7	43.3	40.0	43.3±3.35^dB	13.3	16.7	10.0	13.3±3.35^cB	长势差,芽枯萎严重
4	0.1	10	60.0	70.0	63.3	64.4±5.09^aA	26.7	23.3	30.0	26.7±3.35^bB	长势好,芽浓绿无枯萎
5	0.1	15	50.0	56.7	53.3	53.3±3.35^abcdAB	46.7	43.3	50.0	46.7±3.35^aA	长势好,芽浓绿无枯萎
6	0.1	20	50.0	46.7	53.3	50.0±3.30^cdAB	46.7	40.0	43.3	43.3±3.35^aA	长势一般,芽浓绿无枯萎
CK	0.1%升汞	5	40.0	53.3	63.3	52.2±11.68^bcdAB	60.0	46.7	36.7	47.8±11.68^aA	长势好,芽浓绿无枯萎

处理 Treatment	山梨酸钾 Potassium sorbate /(mg·L^-1)	代森锰锌 Mancozeb /(mg·L^-1)	次氯酸钠 Sodium hypochlorite /%	污染率 Pollution rate/%				生长情况 Growing situation
处理 Treatment	山梨酸钾 Potassium sorbate /(mg·L^-1)	代森锰锌 Mancozeb /(mg·L^-1)	次氯酸钠 Sodium hypochlorite /%	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	均值 Average value	生长情况 Growing situation
1	5	50	0.008	60.0	30.0	40.0	43.3±15.28^bcB	长势好,叶片绿,芽较长
2	5	80	0.010	50.0	60.0	73.3	61.1±11.69^bB	长势较好,叶片较绿,芽较长
3	5	150	0.012	100.0	100.0	100.0	100.0±0.00^aA	长势差,叶片较黄
4	8	50	0.010	20.0	50.0	40.0	36.7±15.28^cB	长势好,叶片绿,芽较长
5	8	80	0.012	100.0	80.0	90.0	90.0±10.00^aA	长势一般,叶片较绿,芽较短
6	8	150	0.008	90.0	100.0	90.0	93.3±5.77^aA	长势较差,叶片发黄,芽较短
7	10	50	0.012	60.0	30.0	20.0	36.7±20.82^cB	长势好,叶片浓绿,芽长
8	10	80	0.008	100.0	100.0	100.0	100.0±0.00^aA	长势差,叶片黄。
9	10	150	0.010	100.0	100.0	90.0	96.7±5.77^aA	长势差,叶片较绿,芽较长
CK	0.1%升汞消毒5 min 高压灭菌			63.3	53.3	40.0	52.2±11.69^bcB	长势好,叶片浓绿,芽较长
K₁	68.1	38.9	78.9	76.7
K₂	73.3	83.7	64.8	63.7
K₃	77.8	96.7	75.6	78.9
R	9.7	57.8	14.0	15.2